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“这个实验其实不不难，一共只分为两步。”

“首先是聚合酶链式反应，即PCR扩增反应；第二步是酶切反应。”

张兴运介绍道。

第一步，在PCR扩增反应部分，只需要跟着想要的结果，明确各种试剂和样品的加入量以及扩增条件，按照正常的要求操作即可。

需要注意的是，吸取试剂时，一定要排尽气泡，由于试剂的加入量都非常小，滴加试剂时，常常出现试剂聚集在枪头尖端，形成一个小液滴，难以滴下，可以将液滴打到离心管内壁上。

利用其与离心管内壁的吸附作用力，将液滴留在离心管内。

最后，再用无菌超纯水补足3滴反应体系后，将离心管盖盖好，至于离一t2机中，离心30秒，以使试剂、样品和水在离心管底部充分混匀。

更有利于PCR反应的顺利进行，可以大大增加扩增反应的成功率。

至于酶切反应。

可以在滴加实验一得到的结果后，再滴加适量BSA，它是一种酶切反应催化剂，能够使酶切反应进行更彻底。

酶切效果更好：通常试剂一与BSA的体积比约为1：2。

“我们在在川贝母的PCR鉴别试验中，SmaI加入量为0。5斗l，BSA的加入量为1斗。滴加BSA后，酶切反应的体系仍为20斗，所以无菌超纯水的加入量要相应减少。酶切反应的条件应设置为30，反应2h。”张兴运说道。

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